總抗氧化能力(T-AOC)檢測試劑盒(A015-2)

使用說明書

僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!

第1版(2016年04月修訂)

[預期應用] 

本試劑盒利用ABTS法測血清、血漿、組織勻漿,細胞,細胞上清中總抗氧化能力(T-AOC)。


[試劑盒內容]

試劑

數量(96T)

試劑

數量(96T)

Reagent 1

1×20ml

Reagent 4

1×0.2ml

Reagent 2

1×1ml

Reagent 5

1×0.1ml

Reagent 3

1×0.5ml

說明書1


[需自備的設備及試劑]

405-425nm濾光片的酶標儀

 

[試劑盒的儲存及有效期]

1. Reagent 1緩沖液溶液,  -20oC可保存6個月。              

2. Reagent 2ABTS原溶液, -20oC可保存6個月, 需避光保存。              

3. Reagent 3H2O2溶液-20oC避光可保存6個月。             

4. Reagent 4過氧化物酶溶液,-20oC避光可保存6個月。            

5. Reagent 510mM Trolox溶液, -20oC可保存6個月, 需避光保存。   

               

[試劑準備]

1. 試劑3溶液配制:將雙蒸餾水(DWW)稀釋至原來體積的1000倍。

2. ABTS溶液制備:混合試劑1、試劑23溶液比例為76:5:4,按需求量配置ABTS溶液。ABTS溶液應在沒有光照的室溫下保存,在30分鐘內使用。

3. 試劑4溶液制備:用試劑1稀釋試劑4至其原始體積的10倍。試劑4溶液應在使用前按所需量配制。

 

[標本處理]

1. 血漿/血漿等液體樣本              

預處理:直接檢測。注意,制備血漿樣品,不推薦使用EDTA作為凝劑。         

     

2. 組織樣本              

預處理:準確稱量樣品,按比例加入生理鹽水,如1g樣品加入9g生理鹽水。在冰上勻漿于4oC,12000 rpm/min 離心5min ,取上清液用于實驗。              

 

3. 細胞              

預處理:收集不少于100萬個細胞,加入200μL冷磷酸鹽緩沖液。通過均漿或超聲處理破細胞,4℃、12000 rpm/min離心5min,取上清液用于實驗              

注意:對于組織樣本和細胞,需檢測總蛋白濃度。建議使用IS003 BCA蛋白定量檢測試劑盒測定蛋白質濃度。

 

[操作步驟]

操作表


空白

標準

樣本

雙蒸水(μl

10

Trolox 溶液 (μl


10

樣本 (μl)



10

試劑4溶液 (μl)

202020

ABTS 溶液 (μl)

170170170
室溫反應6分鐘,在414nm波長測量各孔O.D.值。

注:建議用雙蒸水Trolox 溶液稀釋至0.15、0.3、0.6、0.9、1.2和1.5mM,繪制標準曲線。

 

[實驗原理]

ABTS在適當的氧化劑作用下氧化成綠色的ABTS·+,在抗氧化物存在時,ABTS·+的產生會被抑制,在 405nm或 734nm測定ABTS·+的吸光度即可測定并計算出樣品的總抗氧化能力。Trolox是一種VE的類似物,具有和VE相近的抗氧化能力,用作其它抗氧化物總抗氧化能力的參考。例如,Trolox的總抗氧化能力為 1,相同濃度情況下,其它物質的抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相比的倍數來表示。

 

[下載]

MSDA

 



  • Total Antioxidant Capacity Assay Kit(A015-2)
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  • Certificate
通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證
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